طيف نورسنجي زيرقرمز
Infrared Spectrometry
مقدمه
محدوده طبيعي ß طول موج 75/0 الي 3000 ميكرون ( 13000 الي 33 Cm-1 )
مفيدترين بخش ßطول موج 5/2 الي 15 ميكرون ( 4000 الي 667 Cm-1 )
ß بخش زيرقرمز Infrared) )
ناحيه IR
IR دور ß 10 الي 667 ß Cm-1گسترة انرژي ارتعاشي كم
IR معمولي ß667 الي 4000ß Cm-1ارتعاشات مولكولي تركيبات آلي
IR نزديك ß4000 الي 13000 Cm-1ß ارتعاشات با انرژي زياد
دستگاهوري :
منابع تابش
ß داراي
انرژي و شدت كم ß معمولاً فيلمان ساخته شده از مواد خنثايي كه در حدود
1500 الي 2000 درجه كلوين گرم ميشوند ß داراي منحنيهاي مشخصه جسم سياه
هستند.
منابع نور رايج
ß تابشگر نرنست
ßگلوبار
ß پيچه نيكروم
ß ليزرهاي تنظيم پذير
جايگاه نمونه و نمونهگذاري
مشكل اصلي در تهيه سلها
ßتقريباً همه مواد پرتو زير قرمز را جذب ميكنند ßفقط مواد با خصلت يوني زياد در ناحيه زير قرمز ارتعاشي ندارند
ß غالباً از هاليدهاي قليايي بويژه پتاسیم كلرايد يا پتاسيم بروميد و سديم كلرايد يا سديم بروميد استفاده ميشود
ßمشكل نمگير بودن زياد و كدر شدن در مجاورت آب
برخي سلولها و محدوده كاربرد آنها در زير قرمز
روشهاي موجود براي طيفگيري نمونههاي جامد
ß 1 ـ مُل
ß 2 ـ قرص
1 ـ روش مُل
ß 2 تا 10
ميليگرم از نمونه پودر شده با عامل مُل كننده ( موادي كه محدوده وسيعي از
فركانسهاي زير قرمز را از خود عبور ميدهند مثل هيدروكربن نفتي سنگين
نوجال) ساييد ميشود ßمُل حاصل بايد يكنواخت باشد ß آن را روي يك صفحه
نازك از هاليد قليايي پخش كرده ß بين دو صفحه هاليد قليايي قرار ميدهند ß
انجام طيفگيري
2 ـ روش قرص
ß رايجترين تهيه قرص KBr
حدود 1
ميلي گرم از نمونه ß در هاون كوبيده تا نرم و يكنواخت شود ßدر دستگاه پرس
در فشار حدود 10 تن براي 30 ثانيه قرار داده ميشود ßقرار دادن در جايگاه
نمونه ß طيفگيري
KBrدر زير قرمز ارتعاشي ندارد ßدر IR جذب نداشته ß مزاحمتي در طيفگيري ندارد
تكفامساز
عبارتست از ßيك سيستم شكاف متغير ورودي و خروجي ، يك يا چند وسيله پاشنده و چند آينه براي تاباندن و متمركز كردن تابش.
تكفامسازها در IR
ßمنشورها
ßشبكهها ß مزايا اتلاف انرژي كم ßتفكيك بهتر
ß خطي بودن پاشندگي
ßمقاومت در برابر آب
آشكارسازها
ß در IR شدت كم و انرژي كم
انواع آشكارسازها در IR
ß 1 ـ آشكارسازهاي فوتونيßمبتني بر اثر فوتوهدايتي برخي از نيمه هاديها
ß 2 ـ آشكارسازهاي حرارتي ßترموكوپلها ، ترميستورها يا بلومترها و پنوماتيك
تجزيه كيفي :
مهمترين
كاربرد طيف نورسنجي زير قرمز عمدتاً شناسايي گروههاي عاملي در تركيبات آلي
و معدني است. يك طيف زير قرمز به چهار قسمت تقسيم ميشود :
1 ـ قسمت اول در محدوده cm-12700
ـ 3700 قرار دارد و در آن پيكهاي ارتعاشي مربوط به پيوندهاي O – H ، N – H
، C – H ، موجود است. بنابراين ، جذب الكلها و آمينها در اين محدوده قابل
رؤيت است. پيك اسيدها پهنتر از آمينها است. از پيكهاي معروف در اين محدوده
، پيك C – H آلیفاتيك در cm-12850 ـ 3000 است. C – H تركيبات استيلني در cm-13300 و C – H آلدئيدي در cm-12710 ـ 2745 مشاهده ميشوند.
2 ـ قسمت دوم در محدوده cm-11850 ـ 2700 قرار دارد كه ارتعاشات پيوندهاي سه گانه را نشان ميدهد.
جذب نيتريلها در cm-12225 ـ 2250 و استيلنيها در cm-12190
ـ 2260 از گروههاي مهم در اين قسمت هستند. پيكهاي مربوط به ارتعاشات
پيوندهاي – S – H ، - P – H ، Si – H - به علت سنگيني اتمهاي گوگرد ،
فسفر و سيليسيوم به ترتيب در cm-12550 ـ 2600 ؛ cm-12350 ـ 2440 و cm-12090 ـ 2260 ظاهر ميشوند.
3 ـ قسمت سوم در محدوده cm-11550 ـ 1950 مهمترين قسمت در طيق زير قرمز است.
از جذبهاي مشخص در اين ناحيه پيك گروه عاملي كربونيل در حدود cm-11700
مربوط به تركيباتي مانند آلدئيدها ، كتونها ، اسيدها ، آميدها ، اسيد
هاليدها ، استرها ، انيدريدها و غيره است. پيوندهاي
و نيز در اين محدوده جذب دارند.
4 ـ قسمت چهارم كه به ناحيه اثر انگشت معروف است در محدوده cm-1700 ـ 1500 قرار دارد.
علاوه بر ارتعاشات پيوندهاي ساده C – C كه در اين قسمت ظاهر ميشوند ، گروههاي عاملي مانند
- C – O – C ( اترها و استرها ) در حدود cm-11200 و C – Clدر محدودة cm-1700 ـ 800 پيك جذبي دارند.
تجزيه كمّي :
IR بيشتر براي تجزيه كيفي كاربرد دارد و تجزيه كمّي در
درجه اهميت بعدي قرار دارد و بر اساس قانون بير لامبرت صورت ميگيرد.
استفاده از
پيك مناسب در تجزية كمي ، با اندازهگيري مقادير T0 و Ttبراي محاسبه جذب
از رابطه و استفاده ميشود.
درجهبندي دستگاه :
هر چند وقت يكبار بايد دستگاه توسط يك فيلم نازك و
شفاف از جنسي مثل پلي استايرن درجهبندي شود.
طيف زير
قرمز پلي استايرن ؛ (3027)1 ، (2851)2 ، (1944)3 ، (1802)4 ، (1601)5 ،
(1495)6 ، (1181)7، (1154)8 ، (1028)9 ، (907)10 ، اعداد داخل پرانتز
اعداد موج بر حسب cm-1 هستند.
فصل چهارم
كروماتوگرافي مايع
Liquid Chromatography (LC)
مقدمه :
ـ
يكي از مهمترين مراحل تجزيههاي شيميايي جداسازي آناليت از مزاحمها
ميباشد كه يكي از مهمترين ابزار براي اين عمل كروماتوگرافي ميباشد.
ـ
در تمام روشهاي كروماتوگرافي اجزاي يك مخلوط توسط جرياني از فاز متحرك از
داخل فاز ساكن عبور داده ميشود و جداسازيها بر اساس اختلاف در سرعت
مهاجرت اجزاي مختلف نمونه انجام ميشود.
كروماتوگرافي :
مايع ßفاز متحرك مايع كروماتوگرافي مايع ـ جامد ßفاز ساكن جامد
نوع تعادل :جذب سطحي
كروماتوگرافي مايع ـ مايع ßفاز ساكن مايع
نوع تعادل : تقسيم جسم بين دو مايع انتزاجناپذير
كروماتوگرافي فاز مايع پيوند داده شده
كروماتوگرافي ژل ـ تراوا
كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا (HPLC)
گازي ß فاز متحرك گاز ß گاز ـ جامد
ßكروماتوگرافي مسطح
كروماتوگرافي فاز مايع پيونده داده شده ßفاز ساكن
گونههاي آلي پيوند شده به سطح جامد ßنوع تعادل تقسيمي ـ جذب سطحي
كروماتوگرافي ژل تراوا ßفاز ساكن ژل سخت به صورت مايع در لابلاي جامد پليمري ßنوع تعادل ß اندازه مولكولها
كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا ßفاز ساكن ذرات نسبتاً كوچك ß بيشترين كارايي در ستون
كارماتوگرافي مسطح ß فاز ساكن يك صفحه مسطح يا يك لايه نازك متصل به يك صفحه مسطح
لايه نازك كاغذي
الكتروفورز ß از انواع روشهاي كاروماتوگرافي نيست ß ولي مشابهت زيادي دارد
جداسازي تركيبات باردار در الكتروفورز با استفاده از نيروي الكتروموتوري
در سراسر يك فاز ساكن انجام ميشود. ذرات باردار با سرعتي كه به نسبت بار
به جرم آنها بستگي دارد به طرف الكترود مخالف مهاجرت ميكنند.
فهرستي از كاربردهاي روشهاي جداسازي
مفاهيم مهم در كروماتوگرافي :
كروماتوگرام ßنمودار پاسخ آشكارساز بر حسب زمان يا حجم فاز متحرك
با استفاده از كروماتوگرام ßتجزيه كيفي و كمي
تعداد منحنيهاي موجود در كروماتوگرام ßتعداد اجزاء تشكيل دهنده مخلوط
يك كروماتوگرام مربوط به يك مخلوط سه جزئي ،
كليه مفاهيم مهم در آن نشان داده شده است.
(F) سرعت جزيان فاز متحرك ß حجم فاز متحرك
خارج شده از ستون بر زمان سپري شده (ميليليتر بر دقيقه)
(tR) زمان بازداري ßزمان لازم براي عبور يك جزء از درون فاز ساكن (دقيقه)
(VR) حجم بازداري ßحجم فاز متحرك مورد نياز براي خارج كردن يك جزء از ستون (ميليمتر)
VR = FtR
(t'R) زمان بازداري تنظيم شده
ßاختلاف بين زمان بازداري يك جزء از مخلوط و زمان لازم براي عبور فاز متحرك از فاز ساكن (t0)
(V'R) حجم بازداري تنظيم شده
ßاختلاف حجم بازداري يك جزء مخلوط و حجم لازم براي عبور فاز متحرك از فاز ساكن (V0)
t'R = tR – t0
V'R = VR – V0
بازداري نسبي
ßعبارتست از نسبت زمان يا حجم بازداري تنظيم شده يك جزء مخلوط به زمان يا حجم بازداري تنظيم شده يك تركيب مرجع
كارايي ستون كروماتوگرافي
ß تعداد صفحات فرضي (N) كه در يك ستون وجود دارد.
ارتفاع معادل يك صفحه فرضي (H)
ß طول ستون تقسيم بر تعداد صفحات فرضي
نسبت بازداري
قدرت تفكيك ß معياري از جداسازي دو پيك مجاور
آشكارسازها :
فهرستي از آشكارسازهاي رايج در دستگاههاي كروماتوگرافي
آزمايش 4 ـ 1 ـ تعيين استيل ساليسيليك اسيد ،
كافئين و فناستين در قرص مسكن
به روش كروماتوگرافي لايه نازك (TLC)
مقدمه :
يكي از كاربردهاي عمده TLC بدليل سادگي دستگاه و سرعت زياد در تجزيه كيفي در پزشكي ، زيستشناسي ، شيمي و داروسازي ميباشد.
آزمايش 4 ـ 2 ـ كروماتوگرافي مبادلة يون ،
تفكيك يونهاي Co+2 ، Fe+3 و Ni+2
مقدمه :
مقدار
زيادي از تركيبات معدني و آلي رفتار مبادلة يون از خود نشان ميدهند اما
چون در آزمايشگاههاي تحقيقاتي يكنواختي اهميت دارد مبادلهكنندههاي سنتزي
كه به زرينهاي مبادله كننده يون معروفاند توسعه يافتهاند.
زمينه پليمري در تهيه رزينهاي مبادله كننده يون ß
يك پليمر مشبك به نام پلي استايرن ديوينيل بنزن ßحاصل از پلي استايرن خطي
براي تهيه يك رزين مبادله كننده كاتيوني ، ماده پليمري مذكور سولفونه ميشود تا گروه SO3H روي حلقههاي آروماتيك متصل شود.
تعداد
پيوندهاي عرضي ودر نتيجه تخلخل اين ماده به مقداردي وينيل بنزن بستگي دارد
و عموماً بين 2 تا 12 درصد است. فناوري بسپارش سبب شده است كه اين ماده
بصورت دانههايي با قطرهاي مختلف در دسترس باشد.
كروماتوگرافي مبادله يون
فاز ساكن ß رزين مبادله كننده يون
ßدر اين آزمايش داراي پلي استايرن ديوينيل
بنزن كه با گروههاي پلي تري ميتل آلومنيوم كلريد فعال شده
فاز متحرك ßمايع
آزمايش 4 ـ 3 ـ تعيين مقدار آنتراسن ، بنزن
و نفتالن در يك مخلوط با HPLC